El Virus de la Mancha Anular de la Papaya (PRSV-P) aparece en muchos países tropicales y subtropicales donde se cultiva la papaya (Bateson et al., 1994) y constituye el mayor factor limitante de su producción en todo el mundo (Purcifull et al., 1984). En Cuba, su presencia fue registrada por Ivancheva-Gabrovska et al. (1967), con incidencias altas (80-99 %), en las zonas occidentales y menores hacia las regiones orientales (Fariñas y López, 1986); lo cual trajo como consecuencia la destrucción de la mayoría de las plantaciones.

El conocimiento epidemiológico de los posibles aislamientos que se puedan presentar en una región o país, es un aspecto básico para el estudio de la distribución y manejo de este virus pues, según Tennant et al. (1994), existen plantas transgénicas con niveles elevados de resistencia al virus en determinadas regiones, que manifiestan susceptibilidad frente a aislados de otras zonas geográficas. En Cuba, solo han sido biológicamente analizados e identificados dos aislados verdaderos PRSV-HA (González et al., 1988) y PRSV-VC (Hernández, 1994) correspondientes a La Habana y Villa Clara, respectivamente. No obstante, está registrada la secuencia de la proteina de la capsida (CP) para aislados del PRSV-P colectados en cinco provincias, incluyendo las ya mencionadas. (Portal et al., 2006; Arocha y Jones, 2007)

Con el objetivo de identificar y caracterizar un aislado del PRSV-P colectado en plantaciones de papaya en la provincia de Cienfuegos, se tomaron muestras de hojas de papaya, cultivar Maradol roja, con los síntomas característicos descritos por Jensen (1949) y Conover (1964).

La detección viral se realizó mediante el método ELISA (Clark y Adams, 1977), a través del uso de un sistema comercial para la detección del PRSV (Agdia). Para la identificación por RT-PCR, se realizó una extracción de ARN total de las hojas de papaya con síntomas de la enfermedad a través del sistema comercial RNAeasy® Plant Mini Kit (Qiagen). Se utilizó, además, el sistema comercial Access RT-PCR System (Promega) y oligonucleótidos diseñados para la posterior amplificación del fragmento deseado a partir del ARN extraído.

Para dar seguimiento al desarrollo de la enfermedad producida por este aislado de Cienfuegos (PRSV-CF), se realizó una inoculación de forma mecánica en plantas jóvenes de papaya cultivar Maradol roja. Con este propósito, se tomaron tres hojas expandidas a partir de la tercera hoja desde el ápice (Cruz, 2007) y se utilizó carborundum (600 mesh) como abrasivo. El inóculo utilizado se obtuvo como resultado de la maceración del tejido vegetal (hojas de papaya con síntomas de la enfermedad) en una dilución de 1:10 (peso/volumen) en tampón sodio-potasio 0,01 M (pH 7.0) (Bau et al., 2003) y sulfito de sodio 0,1 %. Se utilizó como testigo, con el fin de establecer una comparación, el aislado verdadero PRSV-VC.
La muestra analizada resultó positiva al diagnóstico serológico en comparación a una muestra sana de papaya. Como resultado de la reacción de RT-PCR se logró la amplificación de un fragmento de ADN de aproximadamente 850 pares de base (pb), que se corresponde con el tamaño esperado correspondiente a la región que codifica para la CP del virus. (Figura 1)

Los síntomas que produce el PRSV son variables y dependen en gran medida del aislado viral. El aislado severo de Villa Clara (Figura 2) mostró diferencias claramente visibles con el aislado procedente de Cienfuegos (Figura 3) en cuanto a la sintomatología producida y momento de aparición.

El primer síntoma descrito para ambos aislados es un mosaico ligero, que coincide con lo descrito por Hernández (1994) y Cruz (2007) para el PRSV-VC, con la manifestación sintomatológica descrita hasta el grado de filiformidad.

Los primeros síntomas, en las plantas inoculadas con el PRSV-VC, aparecieron en la cuarta semana después de la inoculación y luego alcanzó un estado severo de filiformidad. Sin embargo, para el aislado PRSV-CF se observó un retardo en la aparición de los síntomas. Los mismos se iniciaron a los 43 días después de la inoculación y se presentaron como un mosaico leve y ligera deformación de las hojas, después de las 12 semanas. Las infecciones causadas por este aislado en las plantaciones detectadas, no alcanzaron la severidad descrita para otros aislados ya caracterizados en otras provincias del país (La Habana y Villa Clara).